近日，EON体育4平台、微生物代謝國家重點實驗室鐘建江教授⚾️、肖晗副研究員等科研人員成功精準編輯了靈芝酸生物合成的CYP功能基因，在國際上率先建立了蘑菇真菌功能基因精確編輯的技術平臺🤛🏼。最新研究成果以“CRISPR-Cas9 assisted functional gene editing in the mushroom Ganoderma lucidum”為題在線發表在Applied Microbiology and Biotechnology雜誌上。EON体育4博士研究生王平安為論文第一作者🪨，肖晗副研究員和鐘建江教授為共同通訊作者♑️。

蘑菇真菌種類多☂️，自古以來藥食兩用，其代謝產物具有多種重要生物活性♻。但是，該類微生物的功能基因鑒定與表征🤷🏿‍♂️、代謝工程改造等大幅落後於動植物🦍、細菌和低等真菌等其它物種🚣🏻‍♂️，其主要原因是缺乏有效的基因編輯平臺技術🙋🏻‍♂️。鐘建江教授🐚、肖晗副研究員等科研人員近五年來致力於我國名貴蘑菇真菌--靈芝的基因編輯技術的研究🥧，在2017年率先報道了基於CRISPR-Cas9系統的ura3標記基因的敲除（Qin et al. Process Biochem 56: 57-61, 2017）。

該團隊利用靈芝內源u6基因啟動子和有自我切割功能的核酶HDV🧔🏼‍♀️，構建了一個有效的CRISPR-Cas9系統，實現gRNA的體內轉錄🤦🏼‍♂️🏌🏽‍♂️，大幅提升了標記基因ura3的編輯效率。進而成功編輯了靈芝酸生物合成途徑中重要的細胞色素P450基因cyp5150l8。測序結果表明cyp5150l8中斷菌株發生了和供體一致的變化。此外，該系統還中斷了和角鯊烯型三萜合成相關的cyp505d13👨🏿🖤。研究建立的CRISPR-Cas9編輯系統有利於靈芝等蘑菇真菌的分子育種以及其它應用。

該研究獲科技部(No. 2018YFA0901904)、國家自然科學基金委(nos. 31770037 & 31971344)和上海市科委(nos.17ZR1448900 & 18ZR1420300)等項目的資助🏄‍♂️。

原文鏈接：https://link.springer.com/article/10.1007/s00253-019-10298-z